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          人K-RAS基因7種突變檢測試劑盒(PCR熒光法)

          授權產品

          kras突變檢測,篩選肺癌、結直腸癌靶向用藥人群

          產品概述

          人K-RAS基因突變檢測

          人K-RAS基因7種突變檢測試劑盒(PCR熒光法)

          檢測指標 :

          人K-ras基因12、13位密碼子上的常見突變

          預期用途

          檢測人K-ras基因12、 13位密碼子上的常見突變,用于輔助臨床醫生篩選出可受益于愛必妥(Cetuximab)和帕尼單抗(Panitumumab)等靶向藥物的癌癥患者。

          適用機型

          Roche LightCycler480Ⅱ、ABI7500 Real-time PCR detection system

          樣本要求

          病理組織

          產品規格

          24人份/盒

          保存條件及有效期

          -20℃及以下避光冷凍存放,試劑盒有效期為9個月。

          注冊證號

          國械注準20163401342

          適用機型

          實驗室通用的實時熒光PCR平臺

            實驗室常規熒光PCR技術,兼容不同種類檢測

            2小時總檢測流程,小于0.5小時手工操作,靈敏特異、快速精確且自動化

          推薦機型
          Roche LightCycler480ⅡABI7500 Real-tie PCR detection syste

          儀器設置:

          ① Roche LightCycler480Ⅱ,Detection Format:Dual Color Hydrolysis Probe/UPL Probe(FAM、VIC/HEX/Yellow555),Reaction Volue:25ul; ② ABI 7500,Reporter Dye:FAM、VIC;Quencher Dye:NONE;Passive Reference:NONE; 注:由于不同儀器的上的軟件或軟件版本不同,如需要選擇實驗模式,請選擇絕對定量模式進行反應,并且所有孔位均定義為unknown。
          指標意義
          K-RAS突變—肺癌個性化治療靶點
          K-RAS:

          是EGFR信號通路下游的一種小分子G蛋白,突變后抑制了自身的GTP酶活性,使得K-ras蛋白總是處于活化狀態,導致信號通路不受上游EGFR信號指令的調控。研究表明, 結直腸癌患者中K-ras 基因的突變率約為35-40%, 90%的突變發生在12、13位密碼子,其中約70%發生于第12位密碼子, 30%發生于13位密碼子。 多項研究證實K-RAS基因突變狀態與西妥昔單抗療效相關,K-ras基因發生突變時西妥昔單抗治療無效。

           
          美國國家癌癥綜合網絡(NCCN) 2009年版的臨床指南4中明確指出:

          KRAS突變使肺癌患者對EGFR-TKI和結直腸癌的抗EGFR抗體藥物產生耐藥 ,腫瘤患者接受EGFR靶向藥物治療之前,必須進行KRAS基因突變檢測,根據檢測結果決定是否使用EGFR靶向藥物作為臨床治療措施。

          密碼子 12和13(耐藥突變)
          檢測結果 突變 不突變
          愛必妥、維克替比等單抗類藥物 療效差 療效好
          人K-ras基因12和13密碼子上7種常見突變
          Cosic ID 突變名稱 堿基變化 氨基酸變化
          521 Gly12Asp GGT>GAT 甘氨酸到天冬氨酸
          520 Gly12Val GGT>GTT 甘氨酸到纈氨酸
          517 Gly12Ser GGT>AGT 甘氨酸到絲氨酸
          516 Gly12Cys GGT>TGT 甘氨酸到胱氨酸
          522 Gly12Ala GGT>GCT 甘氨酸到丙氨酸
          518 Gly12Arg GGT>CGT 甘氨酸到精氨酸
          532 Gly13Asp GGC>GAC 甘氨酸到天冬氨酸
          產品優勢
          通用的熒光PCR平臺,快速準確成本低

          通用的熒光PCR檢測,成本低廉;
          2小時即可完成整個實驗,檢測速度快;儀器自動判讀結果,更加準確。

          良好的靈敏度,避免漏檢

          檢測靈敏度高,可檢測出樣本中低至1%的突變基因

          全面覆蓋靶向藥物相關位點

          檢測位點全,涵蓋了與靶向藥物吉非替尼等藥物藥敏或耐藥相關突變,為臨床提供全面的輔助判斷。

          注意事項

          推薦樣品類型順序:
          新鮮病變組織>冰凍病理切片>石蠟包埋病理組織或切片>其它類型標本。

           

          注意:為了保證檢測的準確性和提高檢測的靈敏度,檢測所用的DNA質量非常重要。采集的腫瘤組織經常會包含正常的組織細胞,不同類型的腫瘤樣品中正常細胞所占的比例不一樣,而福爾馬林固定的石蠟切片更會影響到提取DNA的質量和純度。

          臨床應用
          指導抗EGFR單抗類藥物的合理使用

          篩查出對導抗EGFR單抗類藥物藥物敏感的患者,制定出最適合患者的腫瘤治療方案


           
          監督治療,節省醫療資源

          B-RAF突變與肺癌患者和結直腸癌患者EGFR靶向治療的耐藥性密切相關,檢測B-RAF突變
          可及時發現耐藥,輔助臨床調整治療方案,避免資源浪費


           
          品牌介紹

          透景生命,專注于多重檢測流式熒光技術應用

          上海透景生命科技股份有限公司(透景生命)成立于2003年,專業從事高端體外診斷產品研發、生產和推廣。

           

          透景生命立足于自主創新,構建了高通量流式熒光雜交技術平臺、高通量流式免疫熒光技術平臺、多重熒光PCR技術平臺、化學發光免疫分析技術平臺等多個技術平臺。

           

          透景生命已累計獲得50余項醫療器械注冊證書,產品包括20種腫瘤標志物、用于宮頸癌篩查的HPV系列產品(HPV27分型、高危HPV5+9和HPV2+12),男性不育相關的Y染色體微缺失檢測、優生優育ToRCH十項檢測以及多腫瘤標志物質控品等。

          人K-ras基因7種突變檢測試劑盒(PCR熒光法)

          規格:24人份/盒

          組分及儲存有效期

          24人份:

          序號 名稱 包裝 體積 描述
          1 突變位點PCR反應液 7管 550µl PCR反應組分,擴增引物,標記探針,內標
          2 外標PCR反應液 1管 550µl PCR反應組分,擴增引物,標記探針,內標
          3 DNA 聚合酶 2管 30µl 熱啟動DNA 聚合酶
          4 陽性質控品 1管 80µl 含7種KRAS突變類型的DNA片段
          5 陰性質控品 1管 300µl 野生型正常人基因組
          試劑盒在-20℃及以下避光冷凍存放,試劑盒有效期為9個月。試劑反復凍融5次有效。開瓶(2~8℃)7天有效,運輸4天內有效。

          樣本類型

          為了保證檢測的準確性和提高檢測的靈敏度,檢測所用的DNA質量非常重要。采集的腫瘤組織經常會包含正常的組織細胞,不同類型的腫瘤樣品中正常細胞所占的比例不一樣,而福爾馬林固定的石蠟切片更會影響到提取DNA的質量和純度。
          1.    推薦樣品類型順序:新鮮病變組織>冰凍病理切片>石蠟包埋病理組織或切片>其它類型標本。
          2.    推薦使用商業化的DNA提取試劑盒,所提取的DNA OD260/OD280在1.6-2.0。提取的DNA立即用于檢測,或保存于-20℃,保存時間不要超過6個月。
          3.    從新鮮病變組織中取樣應確定含有腫瘤病變組織。
          4.    石蠟包埋病理組織或切片應確定含有腫瘤病變組織。
          5.    所用石蠟包埋病理組織或切片保存時間不超過3年。

          適用儀器

            熒光PCR儀
          1 ABI-7500 Real-time PCR detection system
          2 LightCycler® 480 Real-Time PCR System

          CFDA注冊證書

          國械注準20163401342

          操作流程


          透景人KRAS基因突變檢測試劑盒-操作流程四圖合一

          性能指標

          靈敏度 各突變位點最低檢測限均優于1%。
          特異性

          特異性參考品符合率:
          a) 采用無相應靶突變序列的野生型人基因組參考品進行測定,結果各突變位點均為陰性且內標Ct值小于35。
          b) 檢測范圍外的8種突變參考品進行測定,結果各突變位點均為陰性且內標Ct值小于35。
          c) 非人類基因組(金黃色葡萄球菌)進行測定,結果各突變位點均為陰性且內標Ct值小于35。

          重復性 采用經標化的企業參考品,7種突變位點(Gly12Asp、Gly12Val、Gly13Asp、Gly12Cys、Gly12Ala、Gly12Arg、Gly12Ser)混合參考品濃度水平為50%進行10次平行檢測,結果應為陽性且Ct值的變異系數(CV,%)≤5%。

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